旅行 另一種新的視野

yeast-two hybrid system是用來研究protein-protein interaction的工具



他是利用兩個proteins:一個有BD（DNA-Binding domain）, 可以bind住DNA上的promoter；另一個有 AD (activation domain)，能活化特定DNA的transcription。當BD和AD結合，就可以形成transcription activator，來執行DNA transcription。



藉由BD和AD的特性，我們可以把兩個可能相互有作用的蛋白質X和Y分別與BD和AD相連，如果X和Y之間有作用，則AD和BD可以結合成transcription activator，而特殊的基因會被活化



最常見的是用BAIT 和HUNTER plasmids的組合，這兩個plasmids，分別帶有Gal4 gene的BD和AD，當我們把有興趣的protein的基因放入這兩個plasmids中，如果他們有相互作用，則Gal4 gene會被活化，而常用的reporter gene為LacZ，他會使含有「有作用的兩個蛋白質」的細菌在培養基上表現出藍色的colony



這樣就可以簡單的知道這兩個未知的蛋白質之間有沒有交互作用了。

請參見圖：http://www.bioteach.ubc.ca/MolecularBiology/AYeastTwoHybridAssay/